Mục tiêu của nghiên cứu nhằm xác định các điều kiện tối ưu trong sản xuất ethanol sinh học từ bã mía sử dụng nấm men chịu nhiệt có hoạt tính lên men cao. Điều kiện thủy phân bã mía được thực hiện bằng cách sử dụng H₂SO₄ ở các nồng độ 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,25; 1,5; 1,75% v/v và được xử lý ở nhiệt độ 90, 100, 110, 115 và 120^oC, thời gian 10, 15, 20, 25 và 30 phút. Dịch thủy phân được sử dụng để đánh giá khả năng lên men ethanol ở 40^oC với 10 chủng nấm men chịu nhiệt, gồm 6 chủng Pichia kudriavzevii và 4 chủng Saccharomyces cerevisiae. Đánh giá các yếu tố tác động của các yếu tố dinh dưỡng, pH và mật số tiếp giống chủng ban đầu đến quá trình lên men ở 40^oC được bố trí theo Plackett-Burman Design (PBD) và tối ưu hóa bằng phương pháp đáp ứng bề mặt theo bố trí Central Composite Design (CCD). Kết quả cho thấy điều kiện thích hợp cho quá trình thủy phân được xác định với H₂SO₄ ở nồng độ 0,75% (v/v) và xử lý ở 120^oC và 20 phút, điều kiện tối ưu cho quá trình lên men sử dụng chủng P. kudriavzevii CT5.3 được xác định với hàm lượng NH₄NO₃ là 0,38 g/L, MgSO₄.7H₂Olà 0,64 g/L, KH₂PO₄ là 1,06 g/L và mật số giống chủng 3,73 x 10⁶ tb/mL, hàm lượng ethanol đạt 45,8 g/L.